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BCIP/NBT是碱性磷酸酶的常用底物，在碱性磷酸酶的催化下，BCIP会被分解产生强反应性的产物，该产物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于碱性磷酸酶系统的免疫组化、原位杂交等实验的酶促显色。在碱性磷酸酶催化下，在组织切片上结合了碱性磷酸酶偶联物的地方产生深蓝色沉淀，可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。

• NBT对人体有害，操作时请注意穿戴好防护用具。
  
• 为获得最佳实验结S果，请务必优化实验条件。

• 以配制1mL工作液为例：取900μL试剂C，依次加入试剂A和B各50μL，混合均匀。可根据用量的需要，等比例的扩大或缩小各试剂的体积。此工作液应现用现配，配制好的工作液1h内有效。
  
• 滴加适量的BCIP/NBT显色工作液于需要显色的组织切片或细胞凃片上，室温避光孵育5～30min。显微镜下观察控制显色时间。
  
• 蒸馏水充分洗涤以终止反应。如有必要可进行中性红染色液复染。
  
• 水洗，干燥后水溶性封片剂封片，显微镜观察。